题目：基于稳定同位素稀释法的U-HPLC-ESI-MS/MS，用于检测和定量血清中的甲氨蝶呤（A U-HPLC-ESI-MS/MS-Based Stable Isotope Dilution Method for the Detection and Quantitation of Methotrexate in Plasma）

背景：高剂量的甲氨蝶呤（MTX）被用于治疗增生性疾病如淋巴细胞白血病。血浆MTX的治疗药物监测是MTX有效性和不良事件监测的重要手段。作者旨在建立一种基于液相色谱法、电喷射离子化作用及串联质谱分析（LC-ESI-MS/MS）的方法来检测血清中MTX含量，用于治疗药物监测和药代研究。

方法：使用Waters公司超高液相色谱仪和三重四级杆液质联用仪对标本进行分析。色谱条件为：BEH C18色谱柱（2.1 mm x 100 mm，1.7 mμm）、等度洗脱、，流动相为含10 mM碳酸氢铵的21%的甲醇。电喷雾采用正离子形式检测质子碎片：对于简单处理的样品进行综合分析，包括3分钟内的稀释程度和蛋白质沉淀情况。

结果：该方法中，直到50 mμM均呈线性（r ＞ 0.99），且当天的变异系数＜6%，日间变异系数＜10%。平均回收率99%。没有明显的基体效应。当最低浓度的变异系数<20%且S/N＞1:10时，被认为定量下线，为5 nM。采用Abbott TDx荧光偏振免疫法进行的方法对比显示高度统一，但可检测到一个细微明显的负偏倚常数（LC-MS/MS = 0.98 x FPIA - 7.3）。

结论：研究者建立了一种特异、敏感而稳定的同位素稀释LC-ESI-MS/MS 方法用来监测血清中MTX浓度。由于该方法结合了直接的LC-MS/MS样品预处理，故可应用于临床实验室。

（选题审校： 任振宇 北京大学第三医院药剂科）

本文由翟所迪教授及其团队选题并审校，环球医学编辑完成。

相关链接：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22689188