儿童头发皮质醇测量方法的比较
2015年12月,发表于《Ther Drug Monit》的一项研究比较了测量儿童头发皮质醇的两种方法:标准(精细剪发)vs研磨法处理头发。结果显示,精细剪发,并在甲醇和丙酮中序贯萃取,重复两次,能比研磨头发提取更多的皮质醇。
背景:头发皮质醇水平越来越多地用于测量幼儿慢性压力。研究人员打算将目前用来进行头发皮质醇分析的方法进行改良,以便更精确地确定不同人群和年龄组头发皮质醇的参照范围。
方法:作者比较了标准(精细剪发)vs研磨法处理头发(n=16),使用头发蛋白和皮质醇4步萃取工艺(n=16),并比较了液相色谱-质谱法(LC-MS)vs酶联免疫吸附测定(ELISAs)测量头发皮质醇(n=28)。萃取过程包括甲醇和丙酮的序贯提取,重复两次。使用BioTek盘阅读器和专用软件,通过光谱光度在260/280 nm测量的比率来测量头发蛋白,以预测头发溶解状态。使用ELISA试剂盒,测量高、中和低皮质醇值的头发蛋白(n=13)、汇总的头发样本(n=12),并通过LC-MS评价了ELISA试验的内部标准(n=3)。
结果:研磨法和标准法测量的头发皮质醇(rs=0.951,P<0.0001)和蛋白值(rs=0.902,P=0.0002)显示出高度相关,尽管从标准发中获得了更高的皮质醇和蛋白量,分别为16个样本中的13个样本和16个样本中的14个样本(P<0.05)。4步序贯从头发样本中提取了更多量的蛋白质(36.5%、27.5%、30.5%、3.1%)和皮质醇(45.4%、31.1%、15.1%、0.04%)。由LC-MS和ELISA测量的皮质醇值具有相关性(rs=0.737;P<0.0001),通过LC-MS[38.7(14.4~136)ng/mL]在同样的样本中监测到的皮质醇值低于ELISA[172.2(67.9~1051)ng/mL]。LC-MS也监测出皮质醇,其中包含13.4%(3.7%~25.9%)的类固醇监测。
结论:方法研究表明,精细剪发,并在甲醇和丙酮中序贯提取,重复两次,能比研磨头发提取更多的皮质醇。基于这些结果,从人体头发样本中提取皮质醇至少需要3次提取。此外,基于ELISA试验在测量头发皮质醇水平方面比基于LC-MS的试验显示出更多的敏感性。
(选题审校:李慧博 编辑:吴星)
(本文由北京大学第三医院药剂科翟所迪教授及其团队选题并审校,环球医学资讯编辑完成。)
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